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阿拉丁G418篩選抗生素

2021/5/21 9:09:51  作者:阿拉丁試劑


 G418,是一種與慶大霉素相關的氨基糖苷類抗生素,常用作真核細胞的篩選。作為硫酸新霉素的類似物,G418在真核細胞中干擾80S核糖體的功能以及蛋白質的合成。

顯性作用的抗性基因(neor)的表達可篩選包含轉座子Tn601(903)或Tn5的哺乳動物表達載體。當表達抗性的哺乳動物細胞在含有G418的培養基中生長時,約10-14天內產生穩定的菌落。

G418篩選抗生素結構式

產品性質 

 形態:白色粉末

融點:138~144℃

溶解性:溶于水、甲醇

CAS:108321-42-2

分子式 : C20H40N4O10·2H2SO4

分子量 :692.71

比旋: 104-121℃

水分: ≤10%

吸光值: ≤0.015 (280nm,1mg/ml), ≤0.1 (570nm, 100mg/ml)

儲運:室溫下運輸, 干粉在室溫下儲存,溶于水、甲醇,溶液于-20℃儲存。

質量優勢 

1、提供純度>90%(HPLC)的產品,與其他低濃度G418產品相比,使用量更低,更有利于細胞生長

2、效價>700ug/mg

3、嚴格控制ED50值,保證各批次的一致性 

使用方法 

 由于各真核細胞系對G418敏感度不同,需通過實驗確認各新細胞系或細胞株穩定轉染時殺死非穩定轉染細胞所需用量。

最適用量通過建立細胞死亡曲線獲得。將細胞稀釋至1000cell/ml,每孔100ul加入有培養基的24孔板,將每孔中的G418濃度稀釋至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1100ug/ml等12個級別, 培養10-14天,以最低細胞全部死亡濃度為基準,一般400-800ug/ml左右,篩選時比該濃度再高一個級別,維持時使用篩選濃度的一半即可。

濃度范圍參考 

細胞系或機體 G418濃度(ug/ml)
中國倉鼠卵巢細胞 700-800
Madin-Darby犬腎細胞 500
人上皮A431細胞 400
猿CV-1細胞 500
盤基網柄菌屬 10-35
植物 10
酵母 125-500

產品列表 

產品號 產品名稱 規格 CAS 包裝
G274348 G418硫酸鹽  超純級 108321-42-2 1g,5g
G110917 G418硫酸鹽 potency≥650μg/mg 108321-42-2 250mg,1g,5g
G301863 G418溶液 25mg/ml,無菌 108321-42-2 1mL

 

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